分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器，它是一種使用率很高的實驗室儀器。常用于核算、蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。在印染方面，我們可以用分光光度計測量染色時燃料的上染百分率，以及整理在織的衣物上助劑的濃度，還可以用于顏色的測量。同時它還廣泛的應(yīng)用于食品檢測、農(nóng)藥的檢測以及工業(yè)上石油的檢測等，紫外可見光光分度在實驗室中的應(yīng)用非常廣泛。
分光光度計的組成
各種型號的可見分光光度計，就其基本結(jié)構(gòu)來說，都是由五個部分組成的，即光源、單色器、洗手池、檢測器以及信號指示系統(tǒng)。如圖所示：
光源→單色器→吸收池→檢測器→信號顯示系統(tǒng)
分光光度計的基本原理
基于物質(zhì)對不同波長的光的選擇性吸收，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜，當(dāng)光經(jīng)色散后的光譜通過某一溶液時，其中某些波長的光就會被溶液吸收。根據(jù)朗伯-比爾定律，當(dāng)一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時，光強的減小程度和入射光的強度，溶液的濃度以及所透過溶液的長度成正比，其公式為：T=I/I0A=LogI0/I=Kbc
其中：T:透色比I0：入射光強A：吸光度I：頭色光強度K：吸收系數(shù)，1/mol/comb：液層厚,cmC：溶液的濃度,mol/l
光的吸收定律的使用范圍
光的吸收定律不僅適用于有色溶液，也適用于無色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系，不僅適用于可見光的單色光，也適用于紫外和紅外光區(qū)的單色光，但應(yīng)注意，此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過大時，透光性質(zhì)發(fā)生變化，從容使溶液對光的吸收度與溶液濃度不成正比關(guān)系，波長交寬的混合光影響光的互補吸收，也會使測定產(chǎn)生誤差。 |
